Análisis de genes y genotipos KIR/HLA, autoanticuerpos y niveles séricos de IFN-γ, IL-13 e IL-21 en pacientes con esclerosis sistémica

Abstract

Introducción: La esclerosis sistémica (ES) es una enfermedad autoinmune caracterizada por daño a células endoteliales, inflamación, fibrosis en piel y órganos internos, presencia de anticuerpos antinucleares (ANA) y liberación de citocinas como IFN-y e IL-13. Diversas células inmunes intervienen en la patogénesis de la enfermedad, entre ellas células NK y células T, que regulan sus funciones por receptores KIR (killer-cell immunoglobulin-like receptors) al reconocer como ligandos a moléculas HLA-I. La expresión de KIR es estocástica y está regulada por citocinas, como la IL-21. Objetivo: Analizar los genes y genotipos KIR/HLA, la positividad a ANA y los niveles séricos de IFN-y, IL-13 e IL-21 en pacientes con ES. Metodología: A partir de sangre periférica de los sujetos incluidos, se obtuvo DNA para la genotipificación de KIR/HLA por PCR-SSP. Los ANA séricos se realizaron por inmunofluorescencia indirecta y los anti-centrómero proteína B (CENP-B), anti-topoisomerasa I (Scl70), anti-RNA polimerasa III (RNAPol III), anti-fibrilarina (U3RNP) y la IL-13 por ELISA; las citocinas IFN-y e IL-21 se midieron por el sistema BioPlex MAGPIX. Resultados: Los pacientes tuvieron mayor frecuencia de KIR2DL2 (p = 0.0007) y 2DS4del (p = 0.001) que los controles. El genotipo Bx (p = 0.007) así como los genotipos con 7-8 iKIR fueron más frecuente en pacientes (p = 0.01) que en controles. El 78% de los pacientes fueron positivos para ANA, se encontraron 6 patrones y el centromérico fue el más frecuente (38%). La frecuencia de positividad para los autoanticuerpos fue: 28% CENP-B, 6% Scl70, 2% RNAPol III y 12% U3RNP. Los niveles séricos de IL-13 se encontraron más elevados en pacientes que en controles (p < 0.0001) al igual que IFN-y e IL-21, estas dos últimas citocinas sin diferencia significativa. Los niveles de IFN- son mayores en pacientes ANA+ (p =0.02) y en particular durante las primeras etapas de la enfermedad (p =0.04), mientras que IL-13 incrementa en etapas tardías (p =0.045). Conclusiones: Los genes KIR2DL2 y 2DS4del se asociaron con riesgo para ES. La mayoría de los pacientes fueron positivos para los ANA, sin embargo, la frecuencia de CENP-B, Scl70, RNAPol III y U3RNP fue baja. En ES los niveles séricos de IFN-y IL-13 e IL-21 están relacionados con el tiempo de evolución y las características clínicas de la enfermedad.