Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12104/81049
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dc.contributor.advisorPuebla Pérez, Ana María
dc.contributor.advisorDelgado Saucedo, Jorge Iván
dc.contributor.authorOrozco Ceja, Vanessa
dc.date.accessioned2020-06-08T20:04:18Z-
dc.date.available2020-06-08T20:04:18Z-
dc.date.issued1969-12-31
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/81049-
dc.identifier.urihttps://wdg.biblio.udg.mx
dc.description.abstractLos triterpenoides son metabolitos sintetizados por las plantas mediante la ciclación del escualeno, y son ampliamente usados en la medicina asiática por sus propiedades antiinflamatorias y antitumorigénicas (Liby, 2007). En la medicina tradicional mexicana, la corteza, resina y hojas de especies de la familia Burseraceae son utilizadas fundamentalmente para curar la fiebre, el dolor, las heridas y en el tratamiento contra el cáncer (Monroy-Ortiz, 2006). A partir de la resina de Bursera copallifera se aislaron los triterpenoides de tipo ursano: α- amirina y acetato de α-amirina. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto antiinflamatorio que presentan estos triterpenoides mediante la inhibición de la liberación de los mediadores inflamatorios: IL-1β, IL-6, TNF-α y NO en la línea celular ATCC RAW 264.7 estimulados con LPS. La α-amirina [50 μM] inhibió las interleucinas IL-1β, IL-6 y NO; no hubo diferencia en la viabilidad cuando se le comparó con indometacina; sin embargo, no inhibió a TNF-α. El acetato de α- amirina inhibió las interleucinas IL-1β, IL-6, NO y, a [1 μM], inhibió a TNF-α. Con respecto a indometacina [50 μM], tuvo mayor inhibición de IL-6 y NO; no se observó diferencia en la viabilidad ni en la inhibición de IL-1β. En conclusión, el acetato de α-amirina es la molécula con mayor potencial antiinflamatorio y la concentración óptima es 50 μM, elegible para ensayo de inflamación inducida in vivo.
dc.description.tableofcontentsÍNDICE ABREVIATURAS Y SÍMBOLOS ............................................................................................................. 11 INTRODUCCIÓN. ................................................................................................................................ 13 I. ANTECEDENTES .............................................................................................................................. 14 1.1. INFLAMACIÓN ........................................................................................................................ 14 1.1.2. MEDIADORES BIOLÓGICOS EN INFLAMACIÓN. ................................................................... 15 1.1.2. CITOCINAS ....................................................................................................................... 16 1.1.2.1. Interleucina 1. .......................................................................................................... 17 1.1.2.2. Factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α). ................................................................. 17 1.1.2.3. Interleucina 6. .......................................................................................................... 18 1.1.3. ÓXIDO NÍTRICO ................................................................................................................ 18 1.1.4. PARTICIPACIÓN DE LOS MACRÓFAGOS EN LA INFLAMACIÓN. ....................................... 19 1.1.5. MODELO DE INFLAMACIÓN INDUCIDA POR LIPOPOLISACÁRIDO (LPS) Y PRODUCTOS BACTERIANOS. ........................................................................................................................... 20 1.2. FAMILIA BURSERACEAE .......................................................................................................... 22 1.2.1. GÉNERO BURSERACEAE ................................................................................................... 22 1.2.2. DESCRIPCIÓN TAXONÓMICA DE LA ESPECIE Bursera copallifera .................................... 24 1.2.2.1. DESCRIPCIÓN GENERAL Y DISTRIBUCIÓN DEL ÁRBOL .............................................. 24 1.2.2.2. HÁBITAT Y FENOLOGÍA. ............................................................................................ 25 1.3. TERPENOIDES ......................................................................................................................... 27 1.3.1. TRITERPENOIDES ............................................................................................................. 29 1.3.1.1. USO DE TRITERPENOIDES COMO ANTIINFLAMATORIOS. ........................................ 30 1.3.1.2. URSANOS .................................................................................................................. 31 1.3.1.3. ÁCIDO URSÓLICO ...................................................................................................... 32 1.3.1.4. α-amirina y acetato de α-amirina. ........................................................................... 33 II. JUSTIFICACIÓN ............................................................................................................................... 36 III. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ............................................................................................... 37 IV. HIPÓTESIS ..................................................................................................................................... 38 V. OBJETIVOS ..................................................................................................................................... 39 5.1. OBJETIVO GENERAL ................................................................................................................ 39 5.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ......................................................................................................... 39 VI. METODOLOGÍA ............................................................................................................................ 40 6.1. DISEÑO EXPERIMENTAL ......................................................................................................... 40 6.1.1. DESCRIPCIÓN GENERAL DEL ESTUDIO ............................................................................. 41 6.2. MATERIALES ........................................................................................................................... 42 6.2.1. TRITERPENOIDES DE TIPO URSANO α-amirina Y ACETATO DE α-amirina ....................... 42 6.3. ESTANDARIZACIÓN DE CULTIVO CELULAR ............................................................................. 43 6.3.1. LÍNEA CELULAR RAW 264.7 ............................................................................................. 44 6.3.1.1. EXPANSIÓN CLONAL DE LA LÍNEA CELULAR RAW 264.7 .......................................... 44 6.3.2. ESTANDARIZACIÓN DE LA CANTIDAD DE CÉLULAS POR POZO Y CONCENTRACIÓN DE LPS PARA ESTÍMULO CELULAR ......................................................................................................... 48 6.3.3. ESTANDARIZACIÓN DEL TIEMPO DE ESTÍMULO CELULAR .............................................. 49 6.3.4. ESTANDARIZACIÓN CON ÁCIDO URSÓLICO COMO TRITERPENOIDE DE TIPO URSANO DE REFERENCIA. .............................................................................................................................. 49 6.4. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE LA LIBERACIÓN DE CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS Y ÓXIDO NÍTRICO EN EL SOBRENADANTE CELULAR CON LOS TRITERPENOIDES α-AMIRINA Y ACETATO DE α-AMIRINA ............................................................................................................... 52 VII. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ......................................................................................................... 56 7.1. ESTANDARIZACIÓN DEL CULTIVO CELULAR. .......................................................................... 57 7.1.1. ESTRATEGIAS PARA LA DETERMINACIÓN DE LA CANTIDAD DE CÉLULAS POR POZO, LA CONCENTRACIÓN Y EL TIEMPO DE ESTÍMULO CELULAR CON LPS. .......................................... 57 7.1.2. ESTANDARIZACIÓN CON ÁCIDO URSÓLICO (UA) COMO TRITERPENOIDE DE TIPO URSANO DE REFERENCIA. ......................................................................................................... 60 7.2. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE LA LIBERACIÓN DE CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS Y ÓXIDO NÍTRICO EN EL SOBRENADANTE CELULAR CON LOS TRITERPENOIDES α-AMIRINA Y ACETATO DE α-AMIRINA ............................................................................................................... 65 7.2.1. VIABILIDAD CELULAR ....................................................................................................... 65 7.2.2. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE INTERLEUCINA 1β (IL-1β). ...................................... 67 7.2.3. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DEL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALPHA (TNF-α) 70 7.2.4. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DE INTERLEUCINA 6 (IL-6)............................................ 73 7.2.5. EVALUACIÓN DE LA INHIBICIÓN DEL ÓXIDO NÍTRICO (NO). ........................................... 76 VIII. CONCLUSIONES .......................................................................................................................... 82 IX. PERSPECTIVAS Y LIMITACIONES ................................................................................................... 83 APÉNDICE 1 ....................................................................................................................................... 84 1. PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO Y SUERO FETAL BOVINO (FBS) ................................. 84 1.1. Inactivación del suero fetal bovino por calor: ................................................................ 84 1.2. Preparación del medio de cultivo suplementado: ......................................................... 84 2. SOLUBILIZACIÓN DE LPS ........................................................................................................ 84 3. DESCONGELAMIENTO, PASAJE, RASPADO MECÁNICO Y CONTEO CELULAR ........................ 85 3.1. DESCONGELAMIENTO DE LAS CÉLULAS EN CRIOPRESERVACIÓN .................................. 85 3.2. PASAJE, RASPADO MECÁNICO Y CONTEO CELULAR ...................................................... 86 Bibliografía ........................................................................................................................................ 88
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp
dc.subjectTriterpenoides De Tipo Ursano
dc.subjectBursera Copallifera
dc.subjectEfecto Inhibidor
dc.subjectCitocinas Proinflamatorias
dc.subjectMacrofagos Raw 264.7
dc.titleTriterpenoides de tipo ursano obtenidos de Bursera copallifera y su efecto inhibidor de citocinas proinflamatorias en macrófagos RAW 264.7
dc.typeTesis de Maestria
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderOrozco Ceja, Vanessa
dc.type.conacytmasterThesis-
dc.degree.nameMAESTRIA EN CIENCIAS EN QUIMICA-
dc.degree.departmentCUCEI-
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara-
dc.degree.creatorMAESTRA EN CIENCIAS EN QUIMICA-
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