Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12104/80751
Registro completo de metadatos
Campo DCValorLengua/Idioma
dc.contributor.advisorFlores Núnez, Jorge Luis
dc.contributor.advisorRodríguez Betancourtt, Verónica María
dc.contributor.advisorDelgado Saucedo, Jorge Iván
dc.contributor.authorRamírez Alba, Cecilia Erika
dc.date.accessioned2020-04-13T21:41:46Z-
dc.date.available2020-04-13T21:41:46Z-
dc.date.issued2016
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/80751-
dc.identifier.urihttp://wdg.biblio.udg.mx
dc.description.abstractResumen El avestruz es una fuente de carne sustentable, mientras que el cartílago de avestruz termina siendo un tejido de desecho, el cual podría ser usado potencialmente como un biomaterial para la construcción de andamios. El objetivo de esta investigación es caracterizar la composición bioquímica y la morfometría del cartílago nativo y bajo condiciones de estrés como la reticulación o desnaturalización. El tejido de avestruz estudiando se obtuvo de un matadero local, en particular estudiamos el cartílago extraído del corvejón mediante disección roma. La composición bioquímica del tejido se obtuvo mediante espectroscopia Raman. Además, examinamos cartílago avestruz bajo cuatro condiciones desnaturalizantes: 1) la exposición a la ribosa o solución de glucosa con el fin de inducir la reticulación no enzimática en el colágeno; 2) la liofilización / rehidratación; 3) la exposición a la solución ácida o 4) la exposición a la solución de alcalina. Para estudiar los cambios que sufre el cartílago bajo las condiciones de estrés antes mencionadas, utilizamos un espectrómetro Raman confocal, (ThermoScientific DXR Raman) el cual opera a una longitud de onda de excitación de 532 nm. Para estudiar los cambios morfológicos de las fibras de colágeno después del proceso de liofilización se utilizó un microscopio de fuerza atómica (marca Nanosurf easyScan 2). El cartílago de avestruz se comparó con el extraído del pollo, tanto fresco como en condiciones de estrés. En particular, nos enfocamos en estudiar las bandas espectrales Raman correspondientes a la amida I y amida III, Condroitín Sulfato, del colágeno hidroxiprolina y prolina fueron utilizados para monitorear las moléculas de la matriz durante condiciones de estrés. Los resultados de la espectroscopia Raman muestran que el cartílago de avestruz es más resistente a la reticulación o desnaturalización no enzimática en relación con el cartílago de pollo. Imágenes de AFM muestran la pérdida completa de la morfometría de colágeno durante el proceso de liofilización, la cual no puede ser restaurada por la rehidratación. La caracterización de la composición y morfometría del cartílago en condiciones de reticulación y de estrés proveen una visión de los mecanismos de desgaste. Estos datos permitirán abordar futuros experimentos de cultivo celular y biomecánico, identificar rápidamente el cartílago potencial para uso de andamios y optimizar las condiciones de almacenamiento.
dc.description.tableofcontentsIndice Agradecimientos ................................................................................................................. . Índice de Figuras................................................................................................................ ii Índice de Tablas.................................................................................................................. iii Resumen............................................................................................................................... iv Panorama general de esta tesis de investigación....................................................... 1 Capítulo l. Espectroscopia Raman y Microscopia de Fuerza Atómica (AFM)...... 5 1.1 1.2 1.2.1 1.2.2. 1.2.3. 1.2.4. 1.2.5. 1.2.6. 1.3. 1.3.1. Introducción......................................................................................................... 6 Fundamentos de espectroscopia Raman....................................................... 7 Espectroscopia Raman....................................................................................... 7 Funcionamiento de un sistema de espectroscopia Raman...................... 17 Modos normales de vibración molecular....................................................... 19 Simetría y reglas de selección......................................................................... 20 Espectro Raman.................................................................................................. 23 Fluorescencia....................................................................................................... 23 Generalidades de la Microscopia del AFM..................................................... 25 Microscopía de Fuerza Atómica (AFM).......................................................... 25 1.4. Referencias.......................................................................................................... 27 Capítulo 11. Materiales Biológicos............................................................................ 28 2.1. 2.2. 2.2.1. 2.2.2. 2.2.3. 2.3. 2.3.1 2.3.2. 2.3.3. 2.3.4. 2.3.5. 2.4. 2.4.1. 2.4.2. 2.4.3. Introducción......................................................................................................... 29 Cartílago............................................................................................................... 30 Generalidades del avestruz.............................................................................. 30 Generalidades de cartílago............................................................................... 31 Moléculas de la matriz extracelular del cartílago........................................ 34 Colágeno............................................................................................................... 35 Generalidades del colágeno.............................................................................. 35 El colágeno tipo II.............................................................................................. 38 Espectroscopia vibracional en cartílago........................................................ 38 Espectroscopia vibracional en colágeno tipo II........................................... 40 Microscopia de Fuerza Atómica aplicada en cartílago............................... 42 Envejecimiento, maduración y desnaturalización del colágeno............... 43 Generalidades sobre el proceso de envejecimiento y maduración del colágeno............................................................................................................... 43 El proceso de reticulación del colágeno......................................................... 44 La protonación y desprotonación de las proteínas..................................... 45 2.4.4. 2.4.5. 2.5. La liofilización de materiales biológicos......................................................... 46 La disección.......................................................................................................... 47 Referencias.......................................................................................................... 49 Capítulo 111. Metodología............................................................................................. 56 3.1 3.2 3.2.1 3.2.2. 3.3. 3.3.1. 3.3.2. 3.4. 3.4.1. 3.4.2. 3.5. 3.5.1. 3.5.2 3.5.3 3.5.4 Introducción......................................................................................................... 57 Procuración y preparación de las muestras................................................. 58 Preparación de las muestras............................................................................ 58 Extracción del cartílago..................................................................................... 58 Incubación............................................................................................................ 62 Preparación de sustancias para incubar....................................................... 62 Incubación............................................................................................................ 63 Liofilización y rehidratación.............................................................................. 64 Liofilización.......................................................................................................... 64 Rehidratación....................................................................................................... 65 Espectrómetro Raman y Microscopia de Fuerza Atómica......................... 66 Especificaciones de Microscopio Confocal-RAMAN..................................... 66 Calibración del Espectrómetro Raman......................................................... 68 Metodología estadística para validación de resultados de 68 espectroscopia Raman ...................................................................................... . Especificaciones del AFM.................................................................................. 69 3.6. Referencias.......................................................................................................... 71 Capítulo IV. RESULTADOS........................................................................................... 73 4.1. Introducción......................................................................................................... 74 4.2. Resultados del Microscopio de Fuerza Atómica (AFM)............................... 74 4.3. Problemas experimentales (AFM)................................................................... 86 4.4. Resultados experimentales por espectroscopia Raman en cartílago de avestruz................................................................................................................ 87 4.5. Resultados de Espectroscopia Raman en muestras de Pollo.................. 101 4.6. Problemas experimentales (Espectroscopia Raman)................................. 112 4. 7. Resultados estadísticos..................................................................................... 115 4.8. Referencias.......................................................................................................... 117 11R Capítulo V. Discusión .................................................................................................. . 5.1. Glicación............................................................................................................... 119 5.2. Desnaturalización................................................................................................ 123 5.3. Cartílago liofilizado y rehidratado analizado por Microscopia de Fuerza Atómica (AFM) y Espectroscopia Raman........................................ 127 5.4. Referencias.......................................................................................................... 137 Capítulo VI. Conclusión................................................................................................ 139 6.1. Conclusión............................................................................................................ 140 6.2. Dirección futura................................................................................................... 141 ANEXO A.............................................................................................................................. 143 ANEXO 8.............................................................................................................................. 144
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://wdg.biblio.udg.mx/politicasdepublicacion.php
dc.titleCaracterización de cartilago de avestruz mediante espectroscopia de Raman
dc.typeTesis de Maestria
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderRamírez Alba, Cecilia Erika
dc.coverageGuadalajara, Jalisco
dc.type.conacytmasterThesis-
dc.degree.nameMAESTRIA EN CIENCIAS DE MATERIALES-
dc.degree.departmentCUCEI-
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara-
dc.degree.creatorMAESTRA EN CIENCIAS DE MATERIALES-
Aparece en las colecciones:CUCEI

Ficheros en este ítem:
Fichero TamañoFormato 
MCUCEI01176FT.pdf25.44 MBAdobe PDFVisualizar/Abrir


Los ítems de RIUdeG están protegidos por copyright, con todos los derechos reservados, a menos que se indique lo contrario.