Inmovilización de un extracto enzimático de Torulaspora delbrueckii para la síntesis de fructooligosacáridos a partir de jugo de caña

Abstract

Con la finalidad de aumentar la capacidad catalítica de la fructanasa producida por la levadura Torulaspora delbrueckii, se inmovilizó un extracto enzimático de ésta levadura empleando diferentes métodos y soportes como Eupergit®, celita 545, celita 545-concanavalina A, alginato de calcio y quitosano. De estos soportes el mayor porcentaje de inmovilización se logró en alginato de calcio y quitosano (por atrapamiento y unión covalente, respectivamente) en términos de actividad hidrolítica sobre sacarosa con un 98 y 90% del total de la enzima, respectivamente. Se determinó termoestabilidad a ambos soportes y se comparó con la enzima libre. El quitosano resultó ser el soporte con mayor termoestabilidad por lo que se eligió para su caracterización cinética, esto con base a la actividad fructanasa por la naturaleza de la enzima misma, en donde se determinó pH y temperatura de reacción óptima, con los cuales posteriormente se calcularon los parámetros cinéticos de Km aparente y Vmax en sustratos como sacarosa y fructanos de agave (ATF). Una vez caracterizado el extracto inmovilizado se llevaron a cabo pruebas de síntesis de fructooligosacáridos (FOS) a partir de soluciones concentradas de sacarosa para obtener las mejores condiciones y así lograr la síntesis de FOS en jugo de caña concentrado.