Distribución de la fusión génica PML::RARA en las células que participan en la hemofagocitosis observada en leucemia promielocítica aguda

Abstract

RESUMEN La leucemia promielocítica aguda (LPA) se caracteriza por la translocación cromosómica t(15;17)(q24.1;q21.2) que fusiona los genes PML y RARA; el gen híbrido PML::RARA resultante, se considera el causante directo de la patología. Se ha observado el evento de hemofagocitosis por células leucémicas en casos de leucemia mieloide aguda con diferentes arreglos cromosómicos, en estos casos los macrófagos muestran gran actividad fagocítica de otras células sanguíneas. Actualmente no existen datos en la literatura que reporten la frecuencia de hemofagocitosis en LPA, sin embargo, se ha registrado dicha ocurrencia en cinco reportes de caso, 4 de ellos post tratamiento. En la Unidad Médica de Alta Especialidad del Centro Médico Nacional de Occidente, IMSS, área de Hematología, se observó el fenómeno de hemofagocitosis, en los frotis de tres pacientes adultos con LPA antes de que recibieran tratamiento antineoplásico. Debido a la observación conjunta de LPA y hemofagocitosis, así como la falta de determinación del estado de la fusión PML::RARA en las células fagocíticas y fagocitadas, se decide determinar la presencia de la fusión en estos eventos. Métodos Se analizaron un total de 22 pacientes con LPA. Los valores de las variables cuantitativas que se consideraron para el análisis fueron aquellos que se obtuvieron previamente a la toma de muestra de médula ósea y a cualquier tipo de tratamiento o transfusiones. Para determinar la presencia de la fusión génica PML::RARA en el evento hemofagocítico primero se localizaron los binomios hemofagocíticos en los frotis de médula ósea teñidos con Wright, se registraron las coordenadas microscópicas, y posteriormente se realizó la FISH para determinar la presencia o no de la fusión génica en cada célula. El análisis estadístico se realizó con las pruebas de Xi2 (con corrección de Yates), t de Student y correlación de Pearson. Resultados El promedio de edad de los pacientes fue de 25.6 años, 13 de los pacientes fueron adultos y 9 pediátricos; 14 hombres y 8 mujeres. Para el diagnóstico de la HF

xii además de las citopenias, se evaluaron y consideraron la fiebre (9 pacientes) y la organomegalia (1 paciente). En cuanto a los triglicéridos y la ferritina no fue posible evaluar estos criterios antes de que los pacientes iniciaran tratamiento, ya que estas pruebas no están incluidas en el panel de estudios de laboratorio de admisión y diagnóstico de pacientes con sospecha de LPA. El índice de células positivas para PML::RARA al diagnóstico mostró un amplio rango (28-96). El fenómeno de hemofagocitosis fue observado en todos nuestros pacientes con LPA. Se hizo el análisis de 548 binomios hemofagocíticos por FISH y observamos que, 544 (99.27%) células fagocíticas 447 de la combinación a) más 97 de la combinación b), fueron positivas para la fusión PML::RARA; y, solamente, en 4 de los 548 binomios (0.73%), la célula fagocítica fue negativa para la fusión. Adicionalmente, todas las células fagocíticas de eritrocitos y estudiadas por FISH fueron también positivas

para la fusión PML::RARA. Además de estos hallazgos observamos células etotic- like en los 22 pacientes estudiados. Se analizó también el estatus de la fusión

PML::RARA en un total de 379 células PMN y encontramos que 163 (43%) fueron positivas para la fusión. Como parte del análisis in silico de los resultados se realizó un análisis de interacción proteica entre algunos de los elementos activadores de los macrófagos (IL-1B, IL-6, IL-10, IL-18, IL-33, TNF-α, IFN- α, TGF-β y el INF-γ) y los genes involucrados en la fusión PML::RARA Conclusión Los eventos de HF y de etosis se observaron en todos los casos estudiados y ocurrieron previo al tratamiento. La fusión PML::RARA se detectó en el 99.27% de las células fagocíticas y en todas las células etóticas analizadas por FISH. Un porcentaje importante de células PMN (43%) fueron positivas para la fusión PML::RARA. De acuerdo con los antecedentes registrados en la literatura, esta es la primera vez que se describe la presencia de la fusión génica PML::RARA en células fagocíticas

Palabras clave: leucemia rpomielocítica aguda, hemofagocitosis, FISH, etosis, PML::RARA