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https://hdl.handle.net/20.500.12104/83118
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Campo DC | Valor | Lengua/Idioma |
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dc.contributor.advisor | Acevedo Hernández, Gustavo Javier | |
dc.contributor.advisor | Rodríguez Sahagún, Araceli | |
dc.contributor.advisor | Castellanos Hernández, Osvaldo Adrián | |
dc.contributor.author | Mendoza Gómez, Noemí | |
dc.date.accessioned | 2021-05-25T23:46:52Z | - |
dc.date.available | 2021-05-25T23:46:52Z | - |
dc.date.submitted | 2019-12-13 | |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/20.500.12104/83118 | - |
dc.identifier.uri | https://wdg.biblio.udg.mx | |
dc.description.abstract | Se llevó a cabo la obtención de muestras de suelo agrícola con la intención de aislar bacteriófagos que infecten A. tumefaciens. Seguidamente se propagaron y purificaron las partículas virales, se extrajo ADN de fago, se insertó en el vector pBluescript para su posterior secuenciación parcial. Se obtuvieron placas líticas con bordes delineados de un tamaño entre 3-5 mm, transparentes. Una concentración de ADN de fago estimada entre 15-20 ng/μL, pero sin mostrar degradación de éste ni contaminación con ARN. Después de la transformación genética de E. coli, resultaron clonas con inserto que se seleccionaron para extraer el ADN plasmídico, y éste se envió a secuenciar, mostrando similitud con ADN genómico bacteriano, debido a que la muestra no fue tratada previamente con enzimas para que degradaran el ADN bacteriano y por consecuencia se arrastró. En una segunda secuenciación, se mostró ruido en los resultados dado que al parecer el primer para secuenciación M13 se pegaba en otras zonas del plásmido | |
dc.description.tableofcontents | ÍNDICE Pág. DEDICATORIA II AGRADECIMIENTOS III ABREVIATURAS V ÍNDICE VII LISTADO DE TABLAS IX LISTADO DE FIGURAS X RESUMEN XI ABSTRACT XII I. ANTECEDENTES 1 1.1 Generalidades de bacteriófagos 1 1.2 Uso de bacteriófagos para biocontrol de fitopatógenos 3 1.3 Agrobacterium y la enfermedad de la agalla de la corona 4 1.4 Problemas causados por Agrobacterium en cultivos de importancia económica 6 1.5 Control de la enfermedad 7 1.6 Uso de Agrobacterium como vector en la transformación genética 8 II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 10 III. JUSTIFICACIÓN 11 IV. HIPÓTESIS 12 V. OBJETIVOS 12 5.1 Objetivo general 12 5.2 Objetivos particulares 12 VI. MATERIALES Y MÉTODOS 13 6.1 Ubicación del experimento 13 6.2Material biológico 13 6.3 Preparación de células de Agrobacterium tumefaciens para el aislamiento de fagos 13VIII 6.4 Colecta de fagos a partir de muestras de suelo 13 6.5 Aislamiento de fagos 14 6.6 Técnica de la gota 14 6.7 Purificación de fagos 15 6.8 Purificación de partículas virales por precipitación con PEG 15 6.9 Extracción de ADN de bacteriófagos por medio del método de solventes orgánicos (fenol-cloroformo) 16 6.10 Precipitación de ADN con etanol 16 6.11 Electroforesis en gel de agarosa al 0.8% 17 6.12 Obtención de la secuencia parcial del bacteriófago 17 6.13 Reacción en cadena de la polimerasa 18 RESULTADOS Y DISCUSIÓN 21 7.1 Aislamiento de bacteriófagos de Agrobacterium tumefaciens 21 7.2 Extracción de ADN de bacteriófago de Agrobacterium tumefaciens por medio de solventes orgánicos (Fenol-cloroformo) 23 7.3 Transformación genética de E. coli (electroporación) para obtención de plásmido 24 7.4Secuenciación parcial de bacteriófago 26 VIII. CONCLUSIONES 28 IX. PERSPECTIVAS 29 X. BIBLIOGRAFÍA 30 XI. ANEXOS 34 11.1 Formulación de medio LB (Luria-Bertani) 34 11.2 Formulación buffer de fagos (PB) 34 11.3 Resultado de secuenciación de clona 1 (C1) 35 | |
dc.format | application/PDF | |
dc.language.iso | spa | |
dc.publisher | Biblioteca Digital wdg.biblio | |
dc.publisher | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.uri | https://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp | |
dc.subject | Bacteriofagos Aislados | |
dc.subject | Muestras De Suelo | |
dc.subject | Infectar Agrobacterium Tumefaciens | |
dc.title | Caracterización de bacteriófagos aislados de muestras de suelo con capacidad para infectar Agrobacterium tumefaciens | |
dc.type | Tesis de licenciatura | - |
dc.rights.holder | Universidad de Guadalajara | |
dc.rights.holder | Mendoza Gómez, Noemí | |
dc.coverage | OCOTLAN, JALISCO | |
dc.type.conacyt | bachelorThesis | - |
dc.degree.name | LICENCIATURA QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO | - |
dc.degree.department | CUCIENEGA | - |
dc.degree.grantor | Universidad de Guadalajara | - |
dc.degree.creator | LICENCIADA QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO | - |
Aparece en las colecciones: | CUCIENEGA |
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